ELISA試劑盒由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀(guān)等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。
ELISA試劑盒的選型技巧:
1、查找待測(cè)樣本的蛋白濃度
可以通過(guò) NCBI 的文獻(xiàn),uniprot,pax-dab 上給出的蛋白表達(dá)量參考值來(lái)比較 ELISA 試劑盒中給出的樣本值與報(bào)道值是否一致
2、試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測(cè)樣本的種類(lèi)
除試劑盒特別說(shuō)明外,一般不同種屬不能通用。常見(jiàn)待測(cè)樣本種類(lèi)有:血清和血漿(不同抗凝劑),細(xì)胞上清,和細(xì)胞裂解液,試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用
3、試劑盒的檢測(cè)范圍
也就是標(biāo)曲范圍,特別要注意待測(cè)樣本濃度是否落在標(biāo)曲范圍內(nèi),對(duì)于濃度很高的樣本,可以先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測(cè)定樣本
4、試劑盒中的稀釋線(xiàn)性及回收率
a. 稀釋線(xiàn)性:一般指樣本稀釋線(xiàn)性,是將樣本梯度稀釋下來(lái),看各稀釋梯度濃度是否成線(xiàn)性;參考樣本稀釋線(xiàn)性可以選擇樣本的較佳稀釋倍數(shù)
b. 稀釋線(xiàn)性也有做加標(biāo)稀釋線(xiàn)性的情況,加標(biāo)稀釋線(xiàn)性是將標(biāo)準(zhǔn)品加入樣本中測(cè)定加入的標(biāo)準(zhǔn)品濃度測(cè)定是否準(zhǔn)確;同樣也是確定待測(cè)樣本稀釋倍數(shù)的參考指標(biāo)。一般線(xiàn)性和回收率的范圍在 80%-120% 比較合適
5、試劑盒的其它指標(biāo)
a. 靈敏度:試劑盒能夠檢測(cè)到的樣本較低濃度的能力,如果待檢指標(biāo)含量很低,需要選擇高靈敏度的 ELISA 試劑盒
b. 板間和板內(nèi)的變異系數(shù)(CV%): 反映板內(nèi)和不同板之間是否均勻,CV% 一般小于 10% 比較好
6、試劑盒的有效期
試劑盒的有效期一般是半年至一年,樣本準(zhǔn)備時(shí)間需要考慮到試劑盒的有效期
7、試劑盒的特異性
ELISA 試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分,抗體對(duì)有關(guān)。若抗體對(duì)中之一為多抗,另一個(gè)必須為單抗,建議使用雙單抗
8、重復(fù)性
科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性,一般 ELISA 試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在 11% 和 15% 以?xún)?nèi)
9、簡(jiǎn)便性
試劑盒在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下,實(shí)驗(yàn)時(shí)間越短,操作越便利,越容易受到用戶(hù)歡迎。這也不妨作為選擇試劑盒的一個(gè)指標(biāo)
10、經(jīng)濟(jì)性
進(jìn)口分裝試劑盒因?yàn)槭∪ゲ簧傥锪骱蛨?bào)關(guān)費(fèi)用,與國(guó)外*試劑相比價(jià)格上有比較大的優(yōu)惠,而且能提供比較靈活的包裝規(guī)格,特別是 48T 等小包裝,目前很多客戶(hù)因?yàn)閷?duì)品牌的信任度問(wèn)題,主要還是選擇國(guó)外*,但是國(guó)內(nèi)進(jìn)口分裝比較成熟的公司仍然是一個(gè)非常好的選擇